粉碎:(1)將紅豆杉植物的枝葉放入粉碎機(jī)粉碎成顆粒大小為50-100目的粉末,然后利用食品用風(fēng)干機(jī)進(jìn)行干燥,干燥后紅豆杉粉末含水量為10-20%;
發(fā)酵:(2)向紅豆杉植物粉末中加入濃度為60%的乙醇溶液,乙醇溶液的加入量為紅豆杉粉末重量3-5倍,利用混合攪拌機(jī)進(jìn)行混合攪拌,攪拌時間為0.5-1.2小時,并將所得的混合物投入發(fā)酵罐體中密封發(fā)酵,發(fā)酵時間24-36小時,發(fā)酵溫度30-40℃;
超聲振蕩:(3)將紅豆杉粉末混合物放入干凈的容器中,將盛有混合物的容器放入超聲波清洗機(jī)的清洗水槽中,清洗介質(zhì):純凈水,清洗介質(zhì)的加熱溫度35-45℃,超聲波振蕩頻率為30-40khz,振蕩時間1-2小時;
過濾、脫色:(4)對混合物靜置分層、過濾,提取混合液,讓得到的濾液通過活性炭柱,進(jìn)行脫色,得到脫色液,再用濃度為60%的乙醇溶液進(jìn)行萃取,
提純:(5)向脫色后的混合液體內(nèi)部加入硫酸鋁鉀,形成的白色的氫氧化鋁膠體吸收掉混合液中紫杉醇,生成了含紫杉醇膠體和不含紫杉醇的溶液;
干燥、濃縮:(6)將得到的吸附有紫杉醇的氫氧化鋁膠體進(jìn)行干燥,制成顆粒大小80-100目的顆粒,利用重量為氫氧化鋁膠體10-15倍的無水乙醇溶液洗脫含紫杉醇的氫氧化鋁膠體,將得到的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮。
與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有如下有益效果:本發(fā)明采用超聲波振蕩加速紅豆杉植物細(xì)胞內(nèi)有效成分的溶解,提高提純加工效率,利用硫酸鋁鉀在乙醇溶液中形成氫氧化鋁沉淀的物理吸附作用,可吸附混合液體中的紫杉醇,實現(xiàn)固液分離,便于提純、濃縮,簡化了萃取步驟,紫杉醇的萃取成本低,效率高,洗脫率高達(dá)90%以上。
制備步驟為:
粉碎:(1)將紅豆杉植物的枝葉放入粉碎機(jī)粉碎成顆粒大小為50-100目的粉末,然后利用食品用風(fēng)干機(jī)進(jìn)行干燥,干燥后紅豆杉粉末含水量為10-20%;
發(fā)酵:(2)向紅豆杉植物粉末中加入濃度為60%的乙醇溶液,乙醇溶液的加入量為紅豆杉粉末重量3-5倍,利用混合攪拌機(jī)進(jìn)行混合攪拌,攪拌時間為0.5-1.2小時,并將所得的混合物投入發(fā)酵罐體中密封發(fā)酵,發(fā)酵時間24-36小時,發(fā)酵溫度30-40℃;
超聲振蕩:(3)將紅豆杉粉末混合物放入干凈的容器中,將盛有混合物的容器放入超聲波清洗機(jī)的清洗水槽中,清洗介質(zhì):純凈水,清洗介質(zhì)的加熱溫度35-45℃,超聲波振蕩頻率為30-40khz,振蕩時間1-2小時;
過濾、脫色:(4)對混合物靜置分層、過濾,提取混合液,讓得到的濾液通過活性炭柱,進(jìn)行脫色,得到脫色液,再用濃度為60%的乙醇溶液進(jìn)行萃取,
提純:(5)向脫色后的混合液體內(nèi)部加入硫酸鋁鉀,形成的白色的氫氧化鋁膠體吸收掉混合液中紫杉醇,生成了含紫杉醇膠體和不含紫杉醇的溶液;
干燥、濃縮:(6)將得到的吸附有紫杉醇的氫氧化鋁膠體進(jìn)行干燥,制成顆粒大小80-100目的顆粒,利用重量為氫氧化鋁膠體10-15倍的無水乙醇溶液洗脫含紫杉醇的氫氧化鋁膠體,將得到的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮。